El microscopio de fluorescencia es un tipo de microscopio que utiliza los principios de la fluorescencia para poder realizar la visualización de las muestras. A continuación te explicamos en detalle las bases de su funcionamiento, así como el concepto del fenómeno físico de la fluorescencia.
Introducción al microscopio de fluorescencia
El microscopio de fluorescencia tiene ciertas similitudes con el microscopio óptico, puesto que emplea una fuente de iluminación. La diferencia principal es que en el microscopio óptico la fuente de iluminación es mediante una bombilla de luz visible, mientras que la iluminación de del microscopio de fluorescencia emplea rayos de luz con una longitud de onda determinada. Para generarlo puede utilizarse un láser, o bien por una fuente de luz muy potente como una bombilla de vapor de mercurio o de arco de xenón.
Algo característico del microscopio fluorescente es que requiere que las muestras sean tratadas previamente con unas sustancias llamadas fluorocromos o fluoróros. Estas sustancias contienen moléculas que tienen el objetivo de cuando se iluminen emitan una determinada luz con una longitud de onda concreta, y por tanto con un color determinado.
Cómo funcionan los microscopios de fluorescencia
Este tipo de microscopios se caracterizan por utilizar un accesorio especial que es el encargado de generar la iluminación de fluorescencia. La forma en que funcionan este tipo de microscopios es mediante la emisión de un haz de luz no visible sobre la muestra (como por ejemplo luz ultravioleta) de forma que la muestra reacciona reflejando luz visible, que es la que se recoge para generar la imagen aumentada.
En este tipo de microscopios la fuente de luz puede emitir luz con distintas longitudes de onda a elegir, para conseguir diferentes resultados que pueden utilizarse posteriormente para producir la imagen. Para que un compuesto sea susceptible de ser analizado con un microscopio fluorescente, éste debe contener moléculas que sean o bien fluorocromos o bien fluoróforos.
Elementos característicos de un microscopio de fluorescencia
El microscopio de fluorescencia consta de varias partes que son distintivas. En primer lugar, un elemento indispensable es el protector de rayos UV que se encuentra colocado antes del ocular. Sirve para impedir que los rayos UV puedan llegar a los ojos del observador, de modo que pueda dañarlos.
Por otro lado está el módulo de los filtros, donde se encuentra el filtro de excitación que sirve para proporcionar un haz de luz con distintas longitudes de onda. Para utilizar el microscopio de fluorescencia debe emitirse una luz que tenga asignado un ancho de banda compatible con el colorante de fluoróforos con el que se trate previamente la muestra.
Qúe es el fenómeno de la fluorescencia
La fluorescencia es un fenómeno que ocurre en algunos tipos de materiales que son capaces de emitir luz visible cuando sobre ellos incide una luz no visible. En otras palabras, la fluorescencia se da cuando determinados tipos de átomos o moléculas reciben luz con una longitud de onda más corta (como por ejemplo los rayos ultravioleta) y reflejan luz con una longitud de onda más larga (luz visible).
Aplicaciones de un microscopio de fluorescencia
Las aplicaciones en las cuales pueden utilizarse este tipo de microscopios se encuentran principalmente dentro de la medicina y la biología, y especialmente en el campo de la biotecnología. Del mismo modo pueden ser útiles para el estudio de células, así como de estudios inmunológicos.
