El microscopio de contraste de fases se caracteriza porque permite la observación de células vivas sin dañarlas. Esto se consigue gracias a que utiliza una tecnología de contraste de fases en el haz de iluminación. A continuación te explicamos en detalle en que consiste este tipo de microscopio y te mostramos sus principales características.
Breve descripción del microscopio de contraste de fases
El microscopio de contraste de fases fue desarrollado por el físico neerlandés Frits Zernike, descubrimiento por el cual recibió el premio Nobel de Física en 1953. El microscopio de contraste de fases permite aumentar de forma decisiva el contraste de la muestra observada. Para ello manipula la luz de iluminación de forma que aumenta el contraste de la luz dispersada. Esto es posible gracias a un anillo de cambio de fase que se ubica antes del objetivo.
Esto le otorgaba una ventaja competitiva con respecto a los microscopios convencionales de la época, que para poder analizar las muestras requerían de la utilización de colorantes en la muestra para conseguir el contraste suficiente para su visualización. Esto era un problema a la hora de intentar visualizar las células vivas, puesto que éstas no soportaban la tinción y morían, imposibilitando su investigación.
Por lo tanto su principal cualidad es que permite observar células vivas sin requerir la utilización de técnicas de tinción. Esto supuso un gran avance y tuvo un importante impacto en el campo de la biología, haciendo posible la investigación de organismos y células vivas en su medio.
Ventajas con respecto a los microscopios convencionales
Los microscopios convencionales requieren realizar una coloración de las células o tejidos de la muestra, lo que conlleva la muerte o el daño de las mismas. En los casos en los que se requiere realizar la observación sin dañarlos, es necesario utilizar una tecnología especial que lo permita. El microscopio de contraste de fases es un tipo de microscopio que sirve para este cometido, puesto que hace posible la visualización de las células sin necesidad de coloración, y por lo tanto sin dañarlas ni modificarlas.
Cómo funciona el microscopio de contraste de fases
El funcionamiento de este tipo de microscopios se fundamenta en que una muestra (como por ejemplo una célula) tiene distintas zonas con distintos valores de refracción. Cuando la onda de luz del microscopio incide sobre la muestra va a perder energía dependiendo del espesor y de las distintas características de cada punto de la muestra.
Una onda lumínica tiene una longitud de onda determinada a un nivel de energía. Cuando la onda lumínica atraviesa un objeto va a disminuir un poco su nivel de energía y por lo tanto va a tener una mayor longitud de onda. Esto conlleva que se producen unas minúsculas diferencias entre el conjunto de ondas lumínicas que no se pueden percibir a simple vista, aunque sí que se puede detectar en los microscopios de cambio de fases.
Componentes y visualización en un microscopio de contraste de fases
La detección de estos diferencias entre las ondas lumínicas es posible gracias a la utilización de un diafragma anular en el condensador, y un anillo de fase o placa anular en el plano focal. Estos dos elementos sirven para traducir la diferencia de fases o de longitud de onda en diferencia de intensidad. Esta diferencia de intensidad se traducirán en una escala de grises que se mostrarán con color de un tono más oscuro para las zonas de mayor espesor, y más claro para las zonas de menor espesor.
