El microscopio de campo oscuro tiene la particularidad de que emplea un sistema de iluminación que focaliza la luz con forma de cono hueco en la muestra y elimina la luz del fondo. De este modo las imágenes que se obtienen se caracterizan por producir una mejor definición de la zona central de la muestra y oscurecer el fondo. A continuación te explicamos las principales características de la tecnología de campo oscuro.
Descripción del microscopio de campo oscuro
El microscopio de campo oscuro es una variante del microscopio de campo claro que tiene instalado un tipo de condensador especial. Este condensador tiene un disco opaco de color oscuro que permite que las imágenes que se generan tengan propiedades especiales.
De este modo el disco opaco del condensador hace que se bloquee la luz del fondo, y permite que tan solo llegue al objetivo la luz que es atravesada o reflejada por la muestra.
Gracias a este sistema, las imágenes que de otro modo tendrían un fondo blanco, ahora tienen un fondo oscuro. Esto es muy interesante porque genera un contraste especial, que puede servir para examinar organismos vivos que con un microscopio de campo claro necesitarían la utilización de colorantes.
Cómo funciona la iluminación de campo oscuro
En esencia la tecnología de campo oscuro se caracteriza por producir la iluminación de la muestra concentrando un haz de luz con forma de cono hueco sobre la muestra. Esto se produce gracias a una fuente de iluminación con forma de anillo. Posteriormente la muestra es atravesada por el haz de luz de forma que el se dispersa el haz de luz que es recibido por el objetivo. Este sistema de iluminación es una buena alternativa a sistema de iluminación de campo claro que se utiliza en otros microscopios convencionales.
Aplicaciones del microscopio de campo oscuro
El microscopio de campo oscuro sirve para el análisis de muestras no susceptibles de tinción. Éstas serían aquellas muestras que por sus cualidades no pueden ser teñidas ni se les puede aplicar pigmentos de color. Este sería el caso de muestras sobre las que no se quieren causar daños como en células vivas por ejemplo.
A su vez se trata de una tecnología adecuada en el caso de querer observar muestras transparentes, que de otro modo resultarían invisibles con una iluminación convencional. También permite visualizar partículas dispersas en un medio homogéneo y para visualizar los bordes destacados de las muestras.
Por todo esto se utiliza para el estudio de organismos y células vivas, especialmente para las células de la sangre. A su vez también puede ser utilizado para el análisis de fertilidad, a la hora de comprobar la movilidad de los espermatozoides. De este modo es mucho más fácil la visualización y el recuento celular.
El principio de funcionamiento: el efecto Tyndall
El principio que se utiliza en el microscopio de campo oscuro es el denominado efecto Tyndall que se caracteriza porque hace posible observar pequeñas partículas que serían invisible con una iluminación normal.
Al permitir el paso de la luz tan solo por el anillo del disco, se genera un cono hueco de luz que no pasa por la lente. De este modo el campo de fondo aparece oscuro. Esto se debe al fenómeno de la difracción de la luz de las partículas en una suspensión, que desvían la luz y aparecen cuerpos luminosos con un fondo oscuro.
Métodos de observación de campo oscuro
A la hora de realizar la observación de la muestra sobre fondo oscuro existen distintas metodologías. Por un lado existe la observación por transmisión de fondo negro central y de fondo negro anular. Por otro lado podemos encontrar la observación de polarización y la observación de haz perpendicular.
